目的 建立一種血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在視網(wǎng)膜內(nèi)異常表達情況的可視化和定量評估方法,為糖尿病視網(wǎng)膜病變( diabetic retinopathy,DR)的早期檢測和治療提供幫助。 方法 對大鼠視網(wǎng)膜鋪片進行免疫熒光染色和成像。 對 VEGF 和微血管病變區(qū)域進行分割、提取與三維重建,采用 VEGF 陽性單位、微血管密度、分形維數(shù)等定量參數(shù)對結(jié)果進行評估,比較糖尿病視網(wǎng)膜病變 8 周模型組(n = 10)與正常對照組( n = 10)的差異。 結(jié)果 在 DR 病變模型中,VEGF 探針高表達區(qū)域與血管異常區(qū)域存在共定位,VEGF 聚集于視網(wǎng)膜微血管分叉或膨大的血管壁表面。 DR組的微血管分形維數(shù)、密度和三維血管彎曲度明顯高于正常對照組(P<0.05);VEGF 陽性單位( positiveunit,PU)值在 DR 組中明顯高于對比組(P<0.05);微血管空隙度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論 本研究提出的 VEGF 定量評估方法,能夠定性和定量地反映 VEGF 在 DR 模型視網(wǎng)膜中的異常分布,為抗VEGF 藥物研究提供定量及可視化手段。
|